Камера Горяєва. Практичне застосування


  • 0

Лабораторна камера Горяєва, названа на честь російського лікаря, професора Казанського університету Горяєва Н.К., є спеціальним монолітним предметним склом, призначеним для підрахунку кількості клітин в заданому об'ємі рідини. Крім того, використовуючи камеру Горяєва можна визначити збільшення мікроскопа. Камери Горяєва широко застосовуються в області клінічних та біомедичних досліджень.

Камера Горяева купить в Киеве, Харьков

Популярні області застосування камери Горяєва:

  • Підрахунок формених елементів крові
    • Підрахунок еритроцитів
    • Підрахунок лейкоцитів
    • Підрахунок ретикулоцитів
    • І т. п.
  • Підрахунок формених елементів сечі
  • Дослідження еякуляту – оцінка кількісних і якісних параметрів сперматозодиов
  • Обчислення концентрації спор у вакцині
  • Підрахунок ооцист у препараті
  • І т. п.

Камери Горяєва випускаються в двох модифікаціях: двухсеточные (двокамерні) і четырехсеточные (чотирьохкамерні). У визначенні ціни камери Горяєва важливу роль грає якість шліфування скла, метод нанесення сітки – лазерне гравірування або ж вакуумне напилення.

Що собою являє камера Горяєва? Камера Горяєва є не що інше, як прозоре монолітне предметне скло поперечними прорізами і нанесеною спеціальним чином мікроскопічної сіткою. У разі двокамерної камери Горяєва ми маємо чотири прорізи, що утворюють три поперечно розташованих майданчика, при цьому середня майданчик розділена поздовжньої прорізом на дві однакових камери, на кожній з поверхні майданчика яких нанесена сітка. У разі ж чотирикамерній камери Горяєва ми отримуємо предметне скло з п'ятьма прорізами, що утворюють чотири майданчики, при цьому дві внутрішні додатково розділені поздовжньою прорізом для отримання чотирьох камер з нанесеної мікроскопічної сіткою на поверхні майданчиків.

Розглянемо більш детально особливості сітки. Спеціальна сітка, яка наноситься на внутрішні майданчики, розташовані нижче сусідніх бічних майданчиків на 0.1 мм Бічні майданчики призначені для притирання покривного скла до появи Ньютонівських кілець. Як правило, використовують спеціальне покривне скло камери Горяєва з закругленими краями. Після притирання покривного скла створюється камера, закрита з двох боків, а з двох інших залишаються щілини (так звані, капілярні простору), через які і заповнюють камеру. Що конкретно являє собою сітка? Мікроскопічна сітка камери Горяєва розкреслена на великі і маленькі квадрати, згрупованими різними способами. Сітка Горяєва містить 225 великих квадратів (15 рядів по 15 великих квадратів в кожному), разграфленных вертикально, горизонтально, хрест-навхрест і неразграфленных. При цьому розміри малих поділок клітини сітки становлять 0.05 мм, а великих – 0.2 мм Важливо, що малий квадрат зі стороною 0.05 мм у всіх сітках є постійною величиною. Не важко розрахувати, що площа малого квадрата дорівнює 0.0025 мм2, а великого квадрата – 0.04мм2. Тоді отримуємо, що об'єм рідини над квадратом, утвореним великими поділками сітки Горяєва, становить 0.004 микролитра.

Купить камеру Горяева в Киеве, Харькове

Підрахувавши кількість формених елементів (ФЕ) над великим квадратом, можна підрахувати щільність даного типу клітин в суспензії за формулою:

X=M*2.5*10^5

де X - кількість ФЕ/мл, M - кількість ФЕ над великим квадратом.

При роботі з камерою Горяєва важливо стежити, щоб її робочі поверхні залишалися сухими і чистими. Крім того, при підрахунку формених елементів можна допускати наявність повітряних бульбашок на сітці камери, так як вони можуть заважати точності підрахунку.

Після роботи з камерами Горяєва слід виконати їх дезінфекцію одним з допустимих способів:

  1. Занурення в 70%-ний розчин етилового спирту на 30 хвилин
  2. Занурення в 4%-ний розчин формаліну на 60 хвилин при кімнатній температурі.

Наведемо приклади застосування камери Горяєва та деякі формули.

Практичне застосування камери Горяєва

Перш ніж приступити до проведення лабораторних досліджень, рекомендується ретельно протерти камеру Горяєва невеликим шматочком чистого бинта, злегка змоченої в спирті. Ми не радимо використовувати для цих цілей вату, так як вона може залишити волокна. Таким же чином слід обробити і покривне скло камери Горяєва. Врахуйте, що при використанні низькоякісного спирту на поверхнях може утворитися осад, тим чи іншим чином заважає проведенню досліджень. Щоб уникнути появи пов'язаних із цим явищем небажаних ефектів, рекомендується додатково протерти камеру і покривне скло чистим марлевим кулькою без спирту. Притирання покривного скла до камери повинно бути виконано дуже ретельно до появи на місці контакту райдужних кілець (так званих кольорових кілець Ньютона) з обох країв. Для кращого притирання можна скористатися однією хитрістю і злегка видихнути повітря на камеру і покривне скло так, щоб невелика кількість вологи сконденсировалось на поверхнях стекол, що забезпечить кращий контакт.

При відсутності спеціальних покривних скелець, які додаються до камері Горяєва, можна використовувати звичайні стандартні покривні скла.

Крім цільового використання камери Горяєва для підрахунку формених елементів крові і т. п., дане скло може розцінюватися як своєрідний еталон для визначення збільшення мікроскопа. Для цього слід скористатися наступною формулою:

X=(p1-p2)/(a*N)

де X – це збільшення мікроскопа; p1 – положення лівої межі клітини камери Горяєва; p2 – положення правої межі клітини або групи клітин; N – кількість клітин між вимірюваними кордонами; a - розмір клітини камери Горяєва (дорівнює 0,05 мм).

Камера Горяєва також використовується для підрахунку кількості клітин у культурі.

Для підрахунку клітинних елементів у рідинах, що містять їх в менших концентраціях, що використовуються аналогічні по конструкції камери Фукса-Розенталя і Нажотта, мають велику глибину – 0.2 мм і 0.5 мм відповідно. Ці камери використовуються в альгології для кількісного обліку фітопланктону. Часто камера Фукса-Розенталя використовується для підрахунку формених елементів спинномозкової рідини. На відміну від камери Горяєва, великі квадрати сітки Фукс-Розенталя не розграфлені і згруповані по 16 квадратів, причому кожна така група обмежена потрійними лініями.

Підрахунок формених елементів крові

Найбільш часто камери Горяєва використовуються саме для визначення формених елементів крові при проведенні лабораторних досліджень. Так для підрахунку еритроцитів кров необхідно розвести в 200 разів, лейкоцитів – у 20 разів. Кількість формених елементів (ФЕ) в 1мкл крові визначають за формулою:

N=m*4000*s/q,

де N – шукане кількість ФЕ в 1 мкл крові; m – число ФЕ в певній кількості малих квадратів; q – кількість малих квадратів сітки камери Горяєва, в яких підраховувалися ФЕ, s – ступінь розведення крові.

Формула для підрахунку еритроцитів

Для підрахунку еритроцитів використовуються 5 великих або 80 малих квадратів сітки, розташованих по діагоналі. Таким чином, отримуємо наступну формулу:

N=m*4000*200/(5*16)=m*10000

Формула для підрахунку лейкоцитів

Для підрахунку лейкоцитів можна використовувати один із трьох методів:

1. Лейкоцити вважають 64 великих (порожніх) квадратах

N=m*4000*20/(64*16)=m*78,125≈m*78

2. Лейкоцити вважають по всій сітці у 169 великих квадратах (рекомендується для зразків крові з вираженою лейкопенією)

N=m*4000*20/(169*16)≈m*29,6

3. Лейкоцити вважають у 100 великих квадратах (64 порожніх + 36 разграфленных квадратів по периметру сітки)

N=m*4000*20/(100*16)=m*50

Таблиця нормальних значень:

Формені елементи Норма
Еритроцити Чоловіки 4 000 000 – 5 100 000 в 1 мкл
Жінки 3 700 000 – 4 700 000 в 1 мкл
Лейкоцити   4 000 – 9 000 в 1 мкл

Підрахунок формених елементів у сечовому осаді

Для визначення ФЕ в сечовому осаді при аналізах сечі по Нечипоренко, Аддіс-Коковському, Амбурже здійснюється по всій сітці Горяєва і розраховується за формулою:

N=m/0.676,

де N – число ФЕ в 1 мкл осаду; m – число ФЕ, підрахованих по всій сітці; 0.676 – об'єм камери Горяєва (мкл)

Автор статті: Галина Цехмістро

 

Рекомендуємо

Покривні скла для камери Горяєва (10шт.)
121грн.
Немає в наявності Модель: 102711-10
Камера Фукса-Розенталя МініМед 2-х секційна
632грн.
Немає в наявності Модель: 102882-12
Камера Горяєва 2-х секційна
506грн.
Немає в наявності Модель: 102210-10
Камера Горяєва 4-х секційна
696грн.
Немає в наявності Модель: 102211-10
Відгуки можуть залишати тільки зареєстровані користувачі.
Будь ласка, зареєструйстеся
 
Ще ніхто не залишив відгуків.